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實(shí)驗(yàn)案例
首頁 實(shí)驗(yàn)案例 冷凍研磨儀:核酸提取的高效伙伴
2025/6/4 8:52:50
冷凍研磨儀:核酸提取的高效伙伴
來源:上海凈信

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在分子生物學(xué)研究中,核酸提取是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵第一步。動(dòng)植物樣本(如植物葉片、動(dòng)物組織、微生物等)通常具有復(fù)雜的細(xì)胞壁或細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),傳統(tǒng)研磨方法存在效率低、樣品易降解、交叉污染等問題。尤其對(duì)富含纖維或油脂的樣本,常規(guī)液氮研磨耗時(shí)耗力,且高溫易導(dǎo)致核酸斷裂。而冷凍研磨儀通過低溫破碎技術(shù),可實(shí)現(xiàn)樣本的快速均質(zhì)化,為下游實(shí)驗(yàn)提供高質(zhì)量核酸。

實(shí)驗(yàn)原理:

冷凍研磨儀的核心原理是低溫物理破碎

低溫保護(hù):通過預(yù)冷或液氮速凍,使樣本在-196℃至-50℃環(huán)境下瞬時(shí)固化,抑制核酸酶活性,防止核酸降解。

高頻振動(dòng)破碎:研磨珠在儀器驅(qū)動(dòng)下高頻撞擊樣本,通過物理剪切力快速打破細(xì)胞壁/膜,釋放核酸。

均質(zhì)化處理:適配不同體積的研磨管,確保樣本破碎均勻,避免批次差異。

實(shí)驗(yàn)案例分享(以植物葉片RNA提取為例)

植物葉片RNA提取流程圖

樣本預(yù)處理:

取新鮮植物葉片,液氮速凍后剪碎;加入研磨珠及適量裂解緩沖液。

設(shè)備參數(shù)設(shè)置:

預(yù)冷研磨儀至-50℃;,設(shè)置研磨頻率,啟動(dòng)研磨。

樣品收集:

離心(12.000 rpm,5分鐘)取上清。

純化:

按常規(guī)試劑盒步驟進(jìn)行核酸純化即可得到植物RNA。

后續(xù)分析

研磨后的樣本可直接用于核酸質(zhì)量檢測(cè):Nanodrop測(cè)定A260/A280比值(理想值1.8-2.0),瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA/RNA完整性;下游應(yīng)用:PCR擴(kuò)增、基因測(cè)序、轉(zhuǎn)錄組分析等。

DNA溶液真空離心濃縮儀實(shí)驗(yàn)步驟分享:

1.樣本準(zhǔn)備:將含有DNA的溶液加入真空離心濃縮儀的樣品管中。

2.濃縮過程:啟動(dòng)儀器,在真空和離心力的共同作用下,溶液中的溶劑迅速蒸發(fā),DNA被濃縮在樣品管底部。

3.樣本回收:濃縮完成后,關(guān)閉儀器,取出樣品管,用適量緩沖液重懸DNA,即可用于后續(xù)檢測(cè)。

4.后續(xù)分析:

研磨后的樣本可直接用于核酸質(zhì)量檢測(cè):Nanodrop測(cè)定A260/A280比值(理想值1.8-2.0),瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA/RNA完整性;下游應(yīng)用:PCR擴(kuò)增、基因測(cè)序、轉(zhuǎn)錄組分析等。

注意事項(xiàng):

液氮操作需佩戴防凍手套;

研磨管裝載需對(duì)稱平衡,避免儀器震動(dòng)異常。

防污染管理:每次實(shí)驗(yàn)后擦拭研磨倉;

不同樣本批次間更換研磨珠或高壓滅菌處理。

為什么選擇凈信冷凍研磨儀?

效率提升:幾分鐘完成傳統(tǒng)方法30分鐘的工作量;

得率提高:低溫環(huán)境最大程度保護(hù)核酸完整性;

冷凍研磨儀 JXFSTPRP-CLN

支持多樣化樣本:適配昆蟲外骨骼、骨骼、真菌孢子等特殊樣本。

冷凍研磨儀不僅是實(shí)驗(yàn)室的"樣本破碎專家",更是保證數(shù)據(jù)可靠性的一道防線。從基礎(chǔ)科研到臨床檢測(cè),它正以革命性的技術(shù)推動(dòng)生命科學(xué)研究的精準(zhǔn)化進(jìn)程。

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