三七是我國重要的藥用植物之一,又名田七,人參三七等,為五加科人參屬植物,是我國傳統名貴藥物,自古就有“止血神藥”的美稱。距今已有400多年的應用歷史,在國內外久負盛名。三七主產于云南文山。品種缺乏是三七種植存在的重要技術問題,育種標記和方法則是困擾三七育種的重要問題,這與我們對三七的遺傳基礎缺乏了解有關。
研究發現,三七是在9100萬年前與茄科植物馬鈴薯和辣椒分化開來,三七與四倍體的人參屬植物人參和西洋參有9383個共同的基因,976個特有的轉錄本.,基因組測序的完成將為三七全基因組選擇育種、功能基因的發現等提供了基礎,也有利于三七產業關鍵技術問題的解決。
三七樣品中提取DNA,中國農業大學農學院之前采用研缽手工研磨的方法,在研缽內倒入液氮,在凍干狀態下快速研磨,研磨過程中樣品不易研磨,整體研磨樣品不充分,影響實驗效果,因此選擇上海凈信冷凍組織研磨儀。
實驗材料和器具:
樣品:三七
工具:凈信冷凍組織研磨儀(JXFSTPRP-CL-24)
耗材:鋼罐,研磨珠、液氮、剪刀、鑷子等
實驗步驟:
1、準備鋼罐2個,研磨珠若干顆;
2、取三七組織剪成小塊與研磨珠一同放入鋼罐中,將蓋子擰緊;
3、將鋼罐置于裝有液氮的容器內,液氮容量沒過鋼罐即可,冷凍若干分鐘,取出時戴手套或使用鑷子夾取避免液氮凍傷;
4、將適合器放入研磨儀器中固定好,然后開機并將制冷功能打開進行預冷
5、將浸泡過液氮的鋼罐放置適合器內,樣品盡量對稱放置,以保證研磨時的受力平衡,旋緊垂直定位螺旋,將安全鎖扣緊。設置參數,程序結束后即可得到破碎粉末;
6、研磨完畢后請關閉電源,將安全鎖歸位;
7、完成后續 DNA 提取步驟。
注意事項:
1、每支鋼罐內的樣品量一般不超過罐體體積的三分之二,樣品量過多會影響研磨效果。
2、樣品盡量對稱放置,以保證研磨時的受力平衡。
3、樣品夾取過程中戴手套及使用鑷子夾取避免液氮凍傷。
實驗過程、結果圖示:
實用儀器介紹:
此款儀器為上海凈信實業發展有限公司生產的全新全自動樣品冷凍研磨儀,它是一種特殊的、快速的、高效率的、多試管的一致系統??梢栽谳^短的時間內、 低溫狀態下完成對各種樣品的研磨、粉碎、混合及細胞破壁,以保留蛋白質活性。